تبیان، دستیار زندگی
در طرح های قبل در مورد چگونگی کار دستگاه فلوسایتومتری و اجزای آن با هم آشنا شدیم. اما در نهایت خروجی داده های فلوسایتومتری به شکل گراف خواهد بود. انواع مختلفی از گراف ها در فلوسایتومتری وجود دارند که خروجی همگی این داده یک چیز است و ...
عکس نویسنده
عکس نویسنده
بازدید :
زمان تقریبی مطالعه :

فلوسایتومتری 6

اهداف:

  • آشنایی با قسمت های مختلف دستگاه فلوسایتومتری
  • آشنایی با نمایش داده های فلوسایتومتری
  • آشنایی با نوع آنالیز داده های فلوسایتومتری

در طرح درس های قبل در مورد چگونگی کار دستگاه فلوسایتومتری و اجزای آن با هم آشنا شدیم. اما در نهایت خروجی داده های فلوسایتومتری به شکل گراف خواهد بود. انواع مختلفی از گراف ها در فلوسایتومتری وجود دارند که خروجی همگی این داده یک چیز است و آن هم نمایش کمی بیان یک شاخص. همچنین باید توجه داشت که می توان از یک داده انواع مختلف نمودار را رسم نمود.

نمایش داده ها

هر دستگاه فلوسایتومتری نرم افزار خاصی را جهت دریافت، نمایش و آنالیز داده ها بر روی کامپیوتر دستگاه خود فراهم نموده است که قادر است همزمان با کسب داده ها از سایتومتری آنها را آنالیز نماید. نمایش داده ها بر روی نرم افزار به شکل نمودارهای مختلف که مهمترین آنها عبارتند از:

نمودار نقطه ای ( Dot Plot):

در این نوع نمودار هر نقطه نشان دهنده ی یک ذرهو جایگاه آن بر روی نمودار بر اساس شدت و ضعف سیگنال ایجاد شده توسط آن بر روی آشکار ساز می باشد. در این نوع نمودارها، هر جمعیت به صورت تجمعی از ذره ها به صورت فشرده یا کم تراکم دیده می شود.

نمودار تراکمی ( Density Plot ) :

در این نمودار تراکم نقاط که معرف جمعیت های سلولی هستند با رنگ های مختلف نشان داده می شود.

نمودار نقشه ای (Contour Plot):

تجمع نقاط(سلولها) به صورت خطوط نشان داده می شود و مانند نقشه های جغرافیا به نظر می آید.

هیستوگرام (histogram):

بر خلاف نمودارهای قبلی که همزمان دو پارامتر را آنالیز می کردند، در این نمودار فقط یک پارامتر نمایش داده می شود. درحالی كه محور عمودی سایتوگرام تعداد ذرات(سلول ها)را مشخص می كند.

آستانه (Threshold)

آستانه به معنی تعیین مقدار حداقل سیگنال، برای ثبت روی آشكارساز است. وقتی مقدار آستانه توسط کاربر تعریف می شود فقط سیگنال هایی مساوی و یا بیشتر با آن مقدار نمایش داده می شود، به این مفهوم كه فقط سیگنال هایی در آشکارساز ثبت شوند که مقدار آنها از آستانه بیشتر باشد.

جهت دانلود فیلم آموزشی کلیک نمایید.

توضیح فیلم:

یکی از مواردی مهمی که در ثبت سیگنال ها در فلوسایتومتری مهم است، داشتن حداقل میزان سیگنا ثبت شده می باشد. به عبارت دیگر این مهم است که سلولهایی که از نظر اندازه و یا گرانولاریتی بسیار کوچک هستند ثبت نشوند. البته این در حالی است که هدف مطالعه این گونه جمعیت ها نبوده باشد.

تصحیح هم پوشانی رنگهاCompensation:

رنگ های فلورسنس مواد كوچك آلی هستند كه توسط یك طول موج خاص برانگیخته شده و قادر به نشر نور در طول موج خاصی كه بیشتر از طول موج تابشی است، می باشند. طیف نشری رنگ های فلورسنس بسیار گسترده است. طیف نشری برخی فلورکروم ها با یکدیگر هم پوشانی دارد.

بنابراین اگر هدف از مطالعه شما بررسی بیان بیشتر از دو شاخص باشد باید فلروکروم های متصل به آنها به گونه ای انتخاب شوند که کمترین همپوشانی بین فلوروکروم ها وجود داشته باشد. با این حال در بسیاری از موارد دیده شده است که فلروکروم های انتخابی با هم هم پوشانی دارند. برای حل این مشکل باید این هم پوشانی را حذف نمود یا به اصطلاح تصحیح نمود. واژه Compensation در آنالیزهای فلوسایتومتری به تصحیح هم پوشانی رنگ ها برمی گردد و در نرم افزارهای فلوسایتومتری ابزارهایی برای تصحیح مقادیر همپوشانی در نظر گرفته شده است چرا که اگر تصحیح همپوشانی درست صورت نگیرد نمی توان به جواب های به دست آمده قابل اعتماد نیست.


مرکز یادگیری سایت تبیان - تهیه: فاضل صحرانشین سامانی

تنظیم: مریم فروزان کیا